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常见问题
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  • 我做的蛋白质分子量很小(10KD),请问怎么做 WB?

    可以选择 0.2μml 的膜,同时缩短转移时间。也可以将两张膜叠在一起,再转移。其他按步骤即 可。

  • 我的细胞提取液有的有沉淀,有的很清亮,为啥呢?

    a)可能因为你的蛋白没有变性完全,可以适当提高SDS 浓度,同时将样品煮沸时间延长 

    b)也不排除你的抗原浓度过高,这时再加入适量上样缓冲液即可。

  • 为啥我的细胞提取液中没有目标蛋白?

    原因有很多: 

    a)你的细胞中不表达这种蛋白质,换一种细胞;

    b)你的细胞中的蛋白质被降解掉了,你必需加入 PMSF,抑制蛋白酶活性;

    c)你的抗体不能识别目标蛋白,多看看说明,看是否有问题。

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